Informations

Lab 2 : Technique aseptique - Biologie

Lab 2 : Technique aseptique - Biologie


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Vous travaillerez avec de nombreuses espèces de bactéries pathogènes en laboratoire. N'oubliez pas que les bactéries sont présentes dans l'air ainsi que sur la peau, le comptoir et tous les objets et équipements qui n'ont pas été stérilisés. L'outil le plus important pour le transfert des cultures est l'aiguille ou l'anse d'inoculation du fil. Il peut être rapidement stérilisé en le chauffant au rouge dans une flamme de bec Bunsen. Ajustez les entrées d'air du brûleur de sorte qu'il y ait un cône intérieur plus chaud et une flamme extérieure plus froide. Une aiguille sèche peut être stérilisée en la tenant à un angle de 30 degrés dans la partie extérieure de la flamme. Une boucle humide contenant des bactéries doit d'abord être maintenue dans la partie intérieure de la flamme pour éviter les éclaboussures, puis chauffée jusqu'à ce qu'elle soit rouge dans la partie extérieure de la flamme. Flamme toujours la boucle juste avant et après utilisation ! Laissez-le refroidir avant de prélever un inoculum de bactéries (ou vous tuerez les bactéries). Tenez la boucle ou la poignée métallique comme un crayon.

Se souvenir de:

1. Toujours se tenir debout ou transporter les tubes dans un portoir.

2. Ne posez pas le capuchon et ne touchez rien avec.

3. Ne pas retirer le couvercle inutilement ou pendant des périodes prolongées.

4. Mettez toujours le couvercle des assiettes face vers le bas.

Comment faire des stries pour les colonies isolées (SFIC) :

Les cultures mixtes (plus d'une espèce) peuvent être isolées à l'aide de la technique de la plaque striée. Le but est d'acquérir une culture pure d'une espèce de bactéries, dans une seule colonie, à partir d'une culture mixte. L'objectif n'est pas d'avoir des bactéries dans les quatre quadrants mais plutôt d'obtenir des colonies isolées uniques.

Exercer

Pratiquez SFIC en utilisant votre crayon au lieu de la boucle. Une fois que vous avez posé votre crayon dans la « plaque », ne le soulevez plus. Assurez-vous de flamber entre chaque quadrant.

Différents types de milieux pour la croissance bactérienne :

SLANT : milieu solide composé d'agar et de divers nutriments et indicateurs. L'inclinaison donne aux bactéries une plus grande surface sur laquelle se développer dans un tube. Les géloses inclinées sont également utiles pour maintenir les cultures bactériennes, plus que les piles de boîtes de Pétri. Les cultures multiples sont facilement placées dans des supports de tubes à essai et conservées au réfrigérateur. Les bactéries sont inoculées sur une pente à l'aide d'une anse et se développent à la surface de la gélose.

SLANT/DEP : milieu solide composé d'agar et de divers nutriments et indicateurs. Semblable à une inclinaison mais crée une zone profonde, communément appelée « fesses ». Ce type de milieu de culture permet de cultiver des bactéries à la fois dans un environnement aérobie riche en oxygène (surface de la pente) et anaérobie, pauvre en oxygène (bout de la pente). Slant/deeps sont inoculés en poignardant une aiguille dans la crosse, puis en striant immédiatement à travers la surface de la pente.

DEEP : milieu solide composé d'agar et de divers nutriments et indicateurs. Ce type de culture est utilisé pour la croissance de bactéries anaérobies qui se développent en l'absence d'oxygène et sont inoculées en piquant le milieu avec une aiguille.

BOUILLON : milieu liquide composé de divers nutriments et indicateurs. Permet la croissance de grands volumes de bactéries, le niveau de croissance peut être évalué en fonction de la turbidité (nébulosité) de la culture. Les bactéries sont inoculées dans un bouillon à l'aide d'une anse.

BOUILLON + TUBE DURHAM : milieu liquide composé de divers nutriments et indicateurs dans lequel est placé un tube plus petit à l'envers, appelé tube Durham. Les tubes de Durham sont utilisés pour détecter la production de gaz, tels que le CO2 ou le N2, par des micro-organismes. Le tube est d'abord rempli de milieu, puis recueille le gaz au fur et à mesure que les bactéries se développent, créant une bulle. Les bactéries sont ensemencées dans un tube bouillon+Durham à l'aide d'une anse.

PLAQUE : milieu solide réalisé avec de la gélose et divers nutriments et indicateurs. Peut être préparé dans des boîtes de Pétri de différentes tailles. Les plaques sont particulièrement utiles pour isoler une espèce spécifique de bactéries, ce qui n'est pas possible dans un milieu liquide. En utilisant la technique SFIC, les bactéries peuvent être diluées jusqu'à la formation de colonies individuelles. Les bactéries sont inoculées sur une plaque à l'aide d'une boucle

Noter

Veuillez noter qu'une boucle recueillera des concentrations beaucoup plus élevées de bactéries d'une assiette que d'un bouillon. Par conséquent, lors de l'utilisation de la technique SFIC, veuillez considérer le milieu/milieu à partir duquel vous prenez les bactéries.

Transfert aseptique de bactéries :

POUR CE LABO, VOUS TRAVAILLEZ INDIVIDUELLEMENT

1. Vous recevrez Staphylococus epidermidis dans un bouillon et sur une assiette. Ceux-ci seront partagés avec la table et se trouveront à l'avant de chaque table dans un support en plastique blanc.

2. Étiquetez 2 tubes de bouillon, 2 tubes inclinés et 2 plaques.

3. Transférez aseptiquement les bactéries de votre culture BROTH dans un bouillon, une pente et une plaque à l'aide de votre anse.

Noter

Il y aura un test de compétences sur SFIC et les futures opportunités de crédits supplémentaires seront basées sur cette technique, assurez-vous de savoir comment le faire !!

4. Transférez aseptiquement les bactéries de votre culture PLATE dans un bouillon, une pente et une plaque

5. Les plaques seront placées dans l'incubateur à 37°C dans le récipient étiqueté avec votre section de laboratoire. Tous les tubes seront placés dans les racks fournis au bout de votre table. Lorsque votre table est prête, l'un de vous devra placer ce rack dans l'incubateur à 37°C. (si vous avez lu jusqu'à la dernière étape avant de commencer l'inoculation, écrivez votre nom sur un post-it et apportez-le à l'instructeur pour 1 pt de crédit supplémentaire)

Forme bactérienne et disposition :

Les bactéries sont décrites par trois critères de base : la taille, la forme et la disposition. Les unités utilisées pour mesurer les organismes observés au microscope sont les micromètres (μm). Un micromètre est un millionième de mètre. La plupart des microbes mesurent environ 1 µm. Les virus sont généralement 1/10 de cette taille. Les cellules animales ont généralement une taille d'environ 10 um. Les trois formes les plus courantes sont la tige (bacille), la sphère (coc) et le type en spirale (vibrion).

L'arrangement est la manière dont les groupes de bactéries apparaissent ensemble. Certains types d'arrangement courants sont appariés (diplo), grappes ressemblant à des raisins (staphylo) ou chaînes (strepto).


Qu'est-ce que la technique aseptique

La technique aseptique est l'éventail des pratiques de prévention et de contrôle des infections qui sont utilisées pour minimiser la présence de micro-organismes pathogènes au cours des procédures cliniques. Auparavant, les termes « technique stérile », « technique propre » et « technique aseptique » étaient utilisés de manière interchangeable. La terminologie et la pratique correctes sont « technique aseptique ». La « technique aseptique » vise à empêcher que des micro-organismes pathogènes ne soient introduits chez le patient par les mains, les surfaces et l'équipement. La technique aseptique est utilisée pendant les procédures cliniques pour identifier et prévenir la contamination microbienne des pièces et des sites aseptiques en s'assurant qu'ils ne sont pas touchés directement ou indirectement. La technique aseptique protège les patients pendant les procédures cliniques invasives en utilisant des mesures de contrôle des infections qui minimisent, dans la mesure du possible, la présence d'organismes pathogènes. Une méthode de technique aseptique largement utilisée est connue sous le nom de technique aseptique sans contact (ANTT®). L'asepsie est obtenue en protégeant les éléments clés et les sites clés des micro-organismes transférés du personnel de santé et de l'environnement immédiat. Par exemple, lors de l'application ou du changement de pansements, une technique aseptique est utilisée afin d'éviter d'introduire des infections dans une plaie 1) . Même si une plaie est déjà infectée, une technique aseptique doit être utilisée car il est important qu'aucune autre infection ne soit introduite. Une technique aseptique doit être utilisée lorsque le patient a une plaie chirurgicale ou non chirurgicale dans ou autour de l'œil.

Voici quelques exemples de procédures nécessitant une technique aseptique :

  • préparation et administration de liquides ou de médicaments par voie intraveineuse (IV)
  • pansements simples ou complexes
  • pose de sondes urinaires
  • insertion d'une canule intraveineuse (IV) ou d'un cathéter veineux central (CVC)
  • vider ou changer les sacs de drainage

Les six éléments de base de la technique aseptique de la technique aseptique sans contact (ANTT®) :

  1. Hygiène des mains: respect strict d'un nettoyage efficace des mains, à l'aide d'une méthode systématique, effectué avant, pendant, si nécessaire après la contamination, et après des procédures cliniques invasives 2)
  2. Utilisation correcte des gants : utilisation appropriée de gants et d'autres équipements de protection individuelle pour réduire la transmission de micro-organismes nocifs 3)
  3. Protection Key-Part et Key-Site : une méthode d'identification et strictement de ne pas toucher et de protéger de la contamination tactile les parties les plus critiques de l'équipement de la procédure 4)
  4. Technique non tactile : l'habileté de ne toucher aucune partie ou site(s) critique(s) d'une procédure clinique invasive 5)
  5. Désinfection des pièces clés : la désinfection des parties les plus critiques de l'équipement de procédure qui pourraient fournir un point d'entrée pour les micro-organismes nuisibles 6)
  6. Gestion des champs aseptiques : sélectionner les types appropriés de champs aseptiques pour protéger les éléments clés de l'équipement de procédure avant et pendant les procédures cliniques invasives 7)

Sites clés sont des atteintes à l'intégrité de la peau qui pourraient être une porte d'entrée pour les micro-organismes pour coloniser le patient. Cela inclut les plaies et les sites de ponction.

Pièces clés sont toutes les parties de l'équipement qui entrent en contact avec l'équipement procédural ou le patient. Cela comprend les dispositifs invasifs connectés au patient et les perfusions de liquide. Les exemples comprennent:

Si des pièces clés sont contaminées, elles peuvent transférer des micro-organismes au patient.

A quoi sert la technique aseptique ?

La technique aseptique est une compétence importante en prévention des infections pour protéger les patients contre les infections nosocomiales 8) .


Voir la vidéo: Laboratory diagnostics:Blood principles 110أساسيات تحليل الدم حيوانات اليفة الجزء الأول من عشرة (Décembre 2022).